常规生物学实验

双荧光素酶验证实验

网络赌博在线评级 www.rekuqixia.com 荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,常用包括:萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶等。荧光素酶的基因可以被合成并转染到细胞中,将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T细胞等)标记上(即表达)荧光素酶,就可以用高敏感度的CCD相机进行对细胞体内进行观察而不会伤害到细胞。

 

主要应用

潜在启动子/启动子核心区域检测

潜在miRNA3-UTR等调控核心元件检测。

 

实验流程


双荧光素酶报告验证流程图

1、重组质粒制备: 制备含有待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;
2
、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;
3
、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h
4
、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;
5
、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;
6
、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。

 

客户提供

基因模板,若无,我公司负责合成

研究的转录因子信息

预测的启动子或miRNA序列信息及结合位点

 

美轩提供

1、测序结果

2、双荧光素酶检测结果



上海美轩生物科技有限公司
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